General

Scientific Names: Phyllanthus urinaria L

Common Names: Ye Xia Zhu , Zhu Zi Cao, Zhen Zhu Cao, Shi Zi Zhen Zhu Cao, Bai Kai Ye Bi, Di Huai Cai, Xiao Fan Hun.

BOTANICAL:

来 源： 為大戟科油柑屬植物葉下珠 Phyllanthus urinaria L. ，以全草入藥。

植物特征： 一年生草本，高约30厘米。茎直立，通常带紫红色。单叶互生，二列，形似复叶，长椭圆形，长0．5—1．5厘米，宽0．2—0．5厘米，顶端钝或有小尖头，基部圆形，偏斜，背面灰白色，两面无毛；叶柄短，近于无柄；托叶小，披针形。雄花2—3朵，簇生于叶腋，萼片6。蒴果无柄，叶下二列着生，近圆形，赤褐色，表面有小鳞状凸起物；种子灰褐色，有横相沟。花期6—8月，果期9—10月。

植物资源分布： 江苏南部山坡或路旁野生；华东至广东，海南等地均有分布。

生药材鉴定: 本品全草长10～40厘米,基部生有须状根。茎圆柱形,直径0.2～0.3厘米,有纵纹,下部灰褐色,嫩枝有翅状锐棱,灰褐色至棕红色;质脆,易折断,断面中空。叶互生,排成二列,长圆形至例卵形,灰绿色,易脱落;花细小,腋生,常藏于叶下。气微,叶味微苦。以叶多、灰绿色者为佳。

Pharmacology

化学成分: 没食子酸、甲氧基糅花酸、卵谷葘醇、丁二酸、胡萝卜苷、山茶素、阿魏酸、木脂素、檞皮素、短叶苏木酸、柯里拉京、黄酮、去氢诃子次酸、糅质、生物碱、芸香苷、糅料云实素、短叶苏木酸乙脂、短叶苏木酸甲脂、老鹤草素、短叶苏木酚酸和去氢诃子次酸三甲脂等。

Efficacy

Effects of rhIFN-αb and extracts of phyllanthus urinaria L. on HBsAg production in PLC/PRF/5 human hepatoma cell line were in vestigated in vitro. Decreased HBsAg production was regularly demonstrated 48h after the treatment of cells with 50-250IU/mL of rhIFN-αb and 2-4mg/mL phyllanthus urinaria L, especially combining IFN with 10 -5 mol/L Ara-A. Treatment of PLC/PRF/5 cells with hydrocortisone acetate (1 0 -3 mol/L) and Ara-A(10 -5 mol/L) greatly stimulated HBsAg production. The decrease of extracellular HBsAg excretion seemed to be due to inhibition of intracellular HBsAg formation.

观察人重组干扰素α和苦味叶下珠提取物对人肝癌细胞株PLC/PRF /5产生HBsAg的影响. α干扰素主要影响该细胞对HBsAg的合成而抑制其产生HBsAg.干 扰素与阿糖腺苷联合使用可增强对 HBsAg合成的抑制作用.不同浓度的苦味叶下珠提取物对P LC/PRF/5细胞产生HBsAg有不同的影响，较大剂量有较明显的抑制作用，使该细胞株合成HBsAg受抑制，但尚不能除外其与HBsAg特异性结合的可能. 人重组干扰素α和苦味叶下珠在体外均可抑制PLC/PRF/5细胞合成 HBsAg.

将 PLC/PRF/5细胞置于15cm 2 培养瓶中进行培养，每瓶接种的细胞数为1×10 6 个细胞， 每 24h更换1次新鲜培养液.不同浓度的药物对PLC/PRF/5细胞产生HBsAg的影响详见图1. 结果表明， 50与250IU/mL浓度的rhIFN-αb均有明显抑制HBsAg产生的作用，且剂量越大其 抑制作用越明显，而 IFN-αb联合应用Ara-A时其抑制作用更强.苦味叶下珠提取物对PLC/PR F/5细胞产生HBsAg的影响与其浓度密切相关，较小剂量(1mg/mL以下)影响不大，而较大剂 量 (4mg/mL)则有明显的抑制作用.而10 -3 mol/L的醋酸氢化可的松联用10 -5 m ol/L的Ara-A则可明显促进HBsAg的分泌.rhIFN-αb与苦味叶下珠的抑制作用均在给药后48h最明显.用0.2%台盼蓝生理盐水溶液与待测细胞悬液等量混合，置于血细胞计数板下计 数活细胞，发现上述剂量的药物处理后测得活细胞百分率始终＞ 90%.

Ara-A对PLC/PRF/5细胞的毒性 将细胞按 5×10 5 个/mL的浓度接种于培养瓶中，培养24h后分别加入10 -4 ,10 -5 mol/L的Ara-A，结果发现10 -4 mol/L的Ara-A对PLC/PRF/5细胞有明显的毒性作用 ，加药 24h即可见细胞肿胀，细胞内颗粒增多，培养72h后细胞基本死亡(台盼蓝染色示9 5%的细胞为亲染细胞).而10 -5 mol/L的Ara-A虽对PLC/PRF/5细胞有抑制作用，但仍能 维持细胞的完整性，且对 HBsAg的影响不大.

rhIFN-αb与苦味叶下珠提取物的作用 为阐明抑制 PLC/PRF/5细胞合成HBsAg还是抑制其释放出细胞，我们将各有关处理组织细胞在 培养的不同阶段制备细胞抽取物，分别比较细胞内与细胞外 HBsAg的含量，详见图3.结果表 明， PLC/PRF/5细胞外HBsAg含量的改变与其细胞内HBsAg含量的变化密切相关，提示rhIFN- α b与苦味叶下珠提取物使PLC/PRF/5细胞株分泌HBsAg减少与HBsAg的合成受到抑制有关.当 然尚不能除外苦味叶下珠提取物与 HBsAg特异性结合的可能.同样，醋酸氢化可的松联用阿 糖腺苷促进 PLC/PRF/5细胞产生HBsAg是由于该细胞对HBsAg合成增加有关. (source)

叶下珠片对提高免疫功能的作用：动物试验分别研究了叶下珠片对E-花结的形成影响和动物免疫器官胸腺增重。两项试验结果表明叶下珠对动物的免疫功能有明显的增强作用。提高了肌体抗病毒的能力。 (source)

IN VITRO:

1. Huang ST, et al., Aqueous extract of Phyllanthus urinaria induces apoptosis in human cancer cells. Am J Chin Med. 2004; 32(2):175-83.
2. Huang St, et al., Phyllanthus urinaria triggers the apoptosis and Bcl-2 down-regulation in Lewis lung carcinoma cells. Life Sci. 2003 Feb 28; 72(15):1705-16.
3. Giridharan P, et al., Novel substituted methylenedioxy lignan suppresses proliferation of cancer cells by inhibiting telomerase and activation of c-myc and caspases leading to apoptosis. Br J Cancer. 2002 Jul 1; 87(1):98-105.
4. Ji XH, et al., [Effects of extracts from Phyllanthus urinaria L. on HBsAg production in PLC/PRF/5 cell line]. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi. 1993 Aug; 18(8):496-8, 511. Chinese.
   
   

IN VIVO:

1. Bharali R, et al., Chemopreventive action of Phyllanthus urinaria Linn on DMBA-induced skin carcinogenesis in mice. Indian J Exp Biol. 2003 Nov; 41(11):1325-8.
   

Safety

毒理研究： 急毒试验未能测出LD50，按国家《新中药研究指导原则》测定最大耐受量，以叶下珠提取物（2g/ml）小鼠灌胃3ml（相当于360g/kg）。经7day观察未见动物有不良反应，推算出相当于人体（70kg）的相当量408g/70kg0，实际临床推荐量30g/d，低于最大给药量的1.3倍。表现出该药的使用安全性。

长期毒性试验对小白鼠骨髓多染性细胞微核的观察，小鼠生殖细胞减数分裂中期I染色体畸变观察和Ames试验等。结果，叶下珠在体内没有致突变作用，具有良好的安全性。